《陀枪师姐2021》讲述督察戴安娜原本安逸于档案管理的后勤岗位，因缘际会与元祖级陀枪师姐陈三元、飞虎队精英蒙汉森合作破案后，被上司韦展超调入悬案小组。小组由汉森带领，成员各具特色，专门调查被忽视的陈年悬案。安娜与汉森起初互相看不顺眼，在斗法过程中，汉森发现安娜因曾被胁持而患上枪支恐惧症，二人关系逐渐缓和并产生感情。与此同时，安娜重遇多年前的补习学生刘达华，却发现他已加入黑道。面对昔日学生的堕落与内心的愧疚，安娜必须克服心理障碍重新拿起配枪，在汉森和三元帮助下成长为新一代陀枪师姐。故事融合悬案侦破、师徒情谊与警匪对抗，展现女主角从后勤文职到一线干探的蜕变历程。