《陀枪师姐2021》讲述督察戴安娜原本安逸于档案管理后勤岗位，因缘际会与元祖级陀枪师姐陈三元、飞虎队精英蒙汉森合作破案后，被上司韦展超调入悬案小组。小组由汉森带领，成员各具特色，专攻冷门悬案。安娜与汉森起初针锋相对，直到汉森发现她因曾遭胁持而患上枪械恐惧症，二人关系逐渐缓和并产生情愫。与此同时，安娜重遇昔日补习学生刘达华，却发现他已沦入黑道。在情感纠葛与破案压力下，安娜必须克服心理障碍，重新握起手枪，与团队共同侦破悬案，成长为新一代陀枪师姐。故事融合警匪追凶、爱情喜剧元素，展现警队团队合作与个人成长。