《一吻定情电影版2大学篇》延续了相原琴子与入江直树的甜蜜故事。两人考入斗南大学后，直树进入精英云集的理工学院，而琴子则被分到文学院F班。为了接近心上人，琴子费尽心思加入直树所在的网球部，却面临严苛训练和强劲情敌——才貌双全的松本裕子。与此同时，网球部前辈须藤的出现让这段恋情更加复杂，形成微妙的多角关系。琴子的父亲与直树父母（由阵内孝则、石田光、石冢英彦饰演）继续为儿女恋情操心，而同级生理美和直树好友金之介的加入，让大学生活充满欢笑与波折。琴子必须用她特有的笨拙真诚，在这场爱情保卫战中证明真心的力量。