《蜘蛛侠3》讲述了彼得·帕克在成为人人敬仰的超级英雄后，生活看似顺遂，但他内心始终无法释怀自己曾放走小偷导致叔叔被杀的往事。随着他对力量的掌控愈发自信，帕克逐渐变得傲慢自大。一次行动中，他误以为抓到杀害叔叔的真凶，残忍地将其推下高楼致死，事后才发现凶手其实是“沙人”。帕克内心的黑暗面因此被激发，逐渐被外星共生体“毒液”控制，化身邪恶的“毒蜘蛛”。在经历了一系列混乱与痛苦后，帕克最终意识到自己的错误，努力摆脱“毒液”的控制，并重新找回正义的信念，与沙人和毒液展开最终对决，试图拯救自己和他所爱的人。