《300勇士：帝国崛起》是《300勇士》的前傳，故事發生在温泉關戰役的十年前。波斯國王大流士在馬拉松戰役中被希臘聯軍擊敗，臨終前告誡兒子薛西斯不要進攻希臘。然而，薛西斯繼承父親的遺志，成為“萬王之王”，決心征服希臘。與此同時，雅典將軍特米斯托克利被譽為雅典海軍之父，他建立了強大的海軍，並成為希臘的領袖。特米斯托克利與斯巴達國王列奧尼達斯關係緊張，但面對波斯軍隊的巨大威脅，希臘各城邦不得不聯手抵抗。最終，特米斯托克利率領希臘海軍在薩拉米斯海戰中擊敗波斯艦隊，阻止了薛西斯的擴張野心，為希臘贏得了寶貴的時間。